Читать «Новое в современной генетике» онлайн - страница 81

И. Фунг и соавторы (Fung et al., 1983) клонировали фрагмент генома вируса, содержащий только последовательность нуклеотидов гена v-src. Было показано, что эта последовательность содержит полную информацию для индукции саркомы при ее введении в клетки цыплят.

Принципиальное значение имеет тот факт, что онкоген, находясь в геноме вируса, не влияет на жизнедеятельность самого вируса и не нужен для его размножения. Такие онкогенные вирусы имеют неонкогенные аналоги. Это показывает, что если ген выпадает из генома вируса, все свойства вируса сохраняются, теряется только его способность трансформировать клетки животных, что и понуждает их к злокачественному росту. Почему же геном некоторых вирусов содержит ген, который не нужен самому вирусу? Откуда берется этот ген, каким образом он попадает в геном вируса? Почему превращается в онкоген?

В 1979—1981 гг. была дана разгадка происхождения вирусных онкогенов типа Src. Г. Опперманн и соавторы (Oppermann et al., 1979), учитывая, что злокачественная трансформация инициируется одним геном вируса — Src, обнаружили в нормальных клетках цыплят, перепелок, крыс, человека белок, гомологичный тому, что кодирует вирусный ген Src. Это показало, что в нормальных клетках имеется нуклеотидная последовательность гена Src. Стало очевидным, что вирус захватывает эту последовательность при выходе из хромосомы клетки животного. Заражая нормальную клетку, такой вирус путем трансдукции вносит в нее ген Src. После пребывания в вирусе протоонкоген Src преобразуется в онкоген Src и приобретает способность трансформировать нормальную клетку в злокачественную.

Изучение онкогенных вирусов показало наличие около 20 онкогенов, вызывающих разные типы опухолей. Для онкогенов определены их локализация в геноме вируса, первичная структура и кодируемые ими белки (см.: Киселев и др., 1983).

Изучение активности онкогенов широко производится при их влиянии на клетки линии фибробластов мышей N1H3T3, которые легко заражаются при внесении в клетки экзогенной ДНК. Онкогены, попадая в клетки N1H3T3, вызывают их злокачественную трансформацию. Наличие в них онкогена доказывается методами молекулярной гибридизации после клонирования онкогена (Krontiris, Cooper, 1981). Онкогены ретровирусов условно делят на категории независимых и слитных онкогенов. Независимые онкогены транскрибируют информационную РНК, отражающую их собственную нуклеотидную последовательность и соответствующую последовательность кодонов, транслирующую белок. К таким онкогенам относится онкоген Src вируса саркомы Рауса, кодирующий 21S РНК и белок рр60^3го (Erikson et al., 1980), и онкоген ras вируса саркомы крыс, кодирующий белок р21^га’ (Scolnick et al., 1975).

Минимум 20 последовательностей, свойственных разным онкогенам, представлены в геноме каждого вида позвоночных. В нормальных клетках эти последовательности имеют характер протоонкогенов. Таким образом, онкогены ретровирусов имеют своих двойников в клетках животных и человека. Совпадение нуклеотидных последовательностей между этими двойниками является хорошо установленным фактом (Bishop, Varmus, 1982).