Читать «Диагностический справочник иммунолога» онлайн - страница 128
Надежда Николаевна Полушкина
Реакция проводится в динамике с различными дозами митогена и не всегда свидетельствует о нарушении клеточно-опосредованного иммунитета.
Определение С-реактивного белка
Наличие в крови С-реактивного белка зачастую является показателем активности инфекционного процесса. Определение его проводится в реакции презентации с моноспецифической антисывороткой. Для этого капилляр заполняют на треть антисывороткой, затем добавляют аналогичный объем испытуемой сыворотки больного, тщательно перемешивают и инкубируют при температуре 37 °C. Через 2 часа учитывают предварительный результат. Окончательный результат определяют после выдерживания капилляров при комнатной температуре.
Глава 3 Оценка специфической реактивности
В основе лежит определение специфичности взаимодействия реакции «антиген – антитело», которая формирует иммунный ответ на чужеродный агент.
Методы оценки специфической реактивности:
1) определение клеточного иммунитета, Т– и В-лимфоцитов;
2) определение количества иммуноглобулинов;
3) определение циркулирующих иммунных комплексов.
Определение Т– и В-лимфоцитов
Для этого применяется несколько методов. Например, розеткообразование с эритроцитом барана или мыши. Розетка образуется в результате связывания поверхностных рецепторов с введенными в субстрат эритроцитами барана. Она состоит обычно из лимфоцита и 3–5 присоединенных эритроцитов.
Другой метод – метод мононуклеарных антител, для которого используются соответствующие моноспецифические сыворотки, различающиеся в клинической практике по СD-рецепторам:
– СD (3) – Т-лимфоциты;
– СD (4) – Т-лимфоциты хелперы;
– СD (8) – Т-лимфоциты супрессоры;
– СD (16) – WK (натуральные киллеры);
– СD (72) – В-лимфоциты.
Для исследования используются люминесцентный микроскоп и проточный цитометр. По количественному содержанию СD-рецепторов и их соотношению судят о врожденных или приобретенных нарушениях, которые имеют полиэтиологическую природу.
В норме число Т-лимфоцитов составляет 70–80 % от общего числа лимфоцитов периферической крови.
Их снижение отмечается при активности гепатита и системной красной волчанке.
Методы выявления В-лимфоцитов. К ним относятся:
– цитотоксическая реакция с антисывороткой против антигенов;
– иммунофлюоресцентные методы с меченными антисыворотками;
– непрямой метод обнаружения иммуноглобулиновых рецепторов, с использованием стафилококков, содержащих белок А;
– определение с помощью эритроцитов и других частиц;
– смешанный антиглобулиновый тест;
– образование розеток с микробами, покрытыми иммуноглобулинами.
Определение иммуноглобулинов в крови. Определение гуморального иммунитета производится следующими методами:
– радиальная иммунодиффузия в геле с моноспецифическими сыворотками по Манчини;
– нефелометрически с моноспецифическими сыворотками по Чиркину;
– иммуноферментный анализ (ИФА).
С помощью радиальной иммунодиффузии на агаровом геле по Манчини производится количественная оценка содержания JgA, JgM, JgG в сыворотке крови. Это необходимо для диагностики первичной и вторичной иммунной недостаточности, миеломной болезни, а также для проведения контроля иммуномодулирующего лечения.