Читать «Лихорадка Западного Нила» онлайн - страница 41

■ реакцию нейтрализации (РН).

■ реакцию связывания комплемента (РСК).

■ реакцию торможения гемагглютинации (РТГА).

Известно, что реакция нейтрализации (РН) является наиболее специфической их всех используемых серологических методов. В связи с этим ее применяют в ячестве подтверждающего теста при идентификации изолятов вируса. Однако в этом тесте выявляют перекрестно реагирующие антитела. Следовательно, нейтрализация вируса типовой сывороткой без количественного сравнения с гомологической системой недостаточна для идентификации вируса. Эта реакция ставится обычно на новорожденных мышах в качестве защитного теста, а также в культуре клеток с использованием метода бляшек.

Реакция связывания комплемента (РСК) может быть использована с целью определения антигенных групп вирусных изолятов. Эта реакция не всегда применяется как подтверждающий тест, так как между арбовирусами, относящимися к одной и той же антигенной группе, наблюдаются перекрестные реакции, число которых может быть снижено за счет использования специфических моноклональных антител.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) используется для определения вирусных штаммов по антигенным группам, однако она редко используется для специфической идентификации из–за выраженных перекрестных реакций между вирусами, относящимися к одной и той же антигенной группе. Она также широко используется при эпидемиологических обследованиях на вирусные инфекции, так как антигемагглютинины имеют относительно продолжительный срок жизни. Однако применение этих антител ограничено вирусами с гемагглютинирующей активностью.

Для тех вирусов, которые не гемагглютинируют в обычных условиях, может быть использована реакция пассивного торможения. Неспецифические ингибиторы и природные гемагглютинины, представляющие проблему при интерпретации полученных результатов, могут быть удалены путем обработки сывороток. Как и при любом серологическом исследовании, пробы крови берут не менее 2 раз (парные сыворотки): Первый – в острой стадии болезни, второй – через 10–14 дней. Пробы сывороток крови исследуют одномоментно. Для экстренной диагностики используется ТИФА, направленный на поиск IgM, которые появляются уже в начальной стадии заболевания и их можно определить уже на 4–5–й день болезни. Во второй сыворотке обнаруживают IgG. Ретроспективное исследование сывороток крови реконвалесцентов проводят с применением тест–систем для обнаружения IgG.

Таблица 5. Критерии диагностики ЛЗН.

Форма инфекции	Тяжесть заболевания	Эпидемиологические критерии	Клинические данные	Серологическое подтверждение	Изменения СМЖ	Изменения крови, мочи	Исход
Стертая форма	Нет	Связь заболеваний с укусами комаров, выездами за город, проживание вблизи открытых водоемов, отсутствие повторных случаев заболеваний в очаге и связи заболевания с употреблением пищевых продуктов, воды из открытых водоемов, ростом заболеваемости нейроинфекциями в регионе в теплое время года	1–2–дневная лихорадка, длительная астенизация	Скрининг на наличие IgM– антител или нарастание титра IgG–антител			Выздоровление, стойкий иммунитет
ЛЗН без поражения ЦНС	Легкое течение Средней тяжести		Преобладает интоксикационный с–м, лихорадка до 14 дн., упорная головная и мышечные боли, гиперемия и зернистость слизистых, склерит, полиморфные высыпания, иногда рвота, анорексия, гиперестезии	ИФА, РНГА, РТГА, ПЦР	Повышенное давление	Микрогемато– и лейкоцитурия	Выздоровление, стойкий иммунитет
ЛЗН, серозный менингит	Средней тяжести		Высокая лихорадка до 39–40°С до 2 недель, в ряде случаев двухволновая, преобладание ригидности шейных мышц при слабовыраженных γ–мах Кернига и Брудзинского Обратное развитие в течение 7–10 сут Интенсивная головная боль, рвота, легкие катаральные явления, реже – диспептические расстройства, полиморфные высыпания	ИФА, РНГА, РТГА, ПЦР	Повышенное давление, моча прозрачная или слабо опалесцирующая, цитоз от 15–20 до 8000 в 1 мкл, чаще лимфоцитарный, белок, глюкоза – норма или умеренно повышены, белково–осадочные пробы слабо положительны	Умеренный лейкоцитоз с лимфоцитозом	Выздоровление
	Тяжелое течение						стойкий иммунитет
ЛЗН, серозный менингоэнцефалит	Средней тяжести		Гипертермия, выраженная общая интоксикация, нарастающая спутанность сознания, психомоторное возбуждение, подергивание и судороги различных групп мышц У части больных отмечалась очаговая симптоматика в виде поражения ядер черепно–мозговых нервов, нистагма, парезов конечностей На глазном дне отмечались застойные соски зрительных нервов и иногда кровоизлияния Менингеальные симптомы отсутствовали или были слабо выражены В особо тяжелых случаях общемозговые симптомы бурно нарастали, возникали клонико–тонические судороги, развивалась глубокая мозговая кома и больные погибали при явлениях нарушения функции дыхания	ИФА, РНГА, РТГА, ПЦР	Плеоцитоз в разной степени выраженности (от 40 до 2000 клеток в 1 мкл), преобладали лимфоциты Отмечалась белково-клеточная диссоциация	Умеренный лейкоцитоз с лимфоцитозом. При наличии бактериальных осложнений нейтрофилез, ускоренная СОЭ	Выздоровление, стойкий иммунитет
	Тяжелое течение						Летальность до 50%