Читать «Инфекции, передаваемые половым путем» онлайн - страница 79

В пробирках, в которые вылили содержимое смесителей, в даль­нейшем определяют остаточный комплемент (во всех пробирках опыта и контроля). Пробирки с инактивированным комплементом служат как бы контролем для сравнения происшедшего гемолиза.

Расчет специфической иммобилизации производят по следую­щей формуле:

(Число подвижных трепонем в контроле – число подвижных трепонем в опыте) / Число подвижных трепонем в котроле х 100.

Реакция иммобилизации считается положительной, когда про­цент иммобилизации выше 51; от 31 до 50 % – слабоположитель­ной; сомнительной – от 21 до 30% и отрицательной – ниже 20 %.

Опыт с сомнительными, а иногда и слабоположительными ре­зультатами следует повторить; при этом можно получить или поло­жительный, или отрицательный результат. Неудовлетворительным считается результат, если имеется большое бактериальное загрязне­ние или отмечается токсичность сыворотки. Такие исследования сле­дует повторить с новой порцией сыворотки. Целесообразно также подвергать повторному исследованию все сыворотки, давшие пол­ное расхождение со стандартными серологическими реакциями. Эти сыворотки заслуживают особого внимания, так как в таких случаях результаты РИБТ могут дать опору для суждения о наличии или отсутствии сифилиса.

При постановке опыта обращают внимание на соблюдение сте­рильности и чистоты посуды. Она должна быть свободна от примеси веществ, могущих оказать вредное влияние на жизнеспособность трепонем. Смесители и всю посуду моют сначала холодной водой, затем горячей, споласкивают дистиллированной водой, не приме­няя никаких дезинфицирующих средств. Смесители стерилизуют в автоклаве, подсушивают в сушильном шкафу.

Описанная методика РИБТ достаточно проста и дает возмож­ность ставить реакцию иммобилизации всюду, где имеются квали­фицированный персонал и возможность содержать кроликов. Этот метод можно использовать также с другими питательными средами.

Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИП) Приводится по методическим рекомендациям, составленным Г.П. Ав­деевой (Узбекский научно-исследовательский кожно-венерологический институт). основа­на на том, что вирулентные тканевые трепонемы, сенсибилизированные сывороткой больного сифилисом, в присутствии компле­мента и эритроцитов прилипают к поверхности эритроцитов и при центрифугировании увлекаются с ними в осадок, исчезая из надосадочной жидкости.

Перед началом работы, связанной с приготовлением антигена из бледных трепонем, в кастрюлю объемом 2-3 л наливают на 2/3 дистиллированной воды и в процессе работы складывают в нее кол­бы, пробирки, пипетки, предметные стекла, загрязненные антиге­ном. Готовят также почкообразный тазик, заливаемый на 2/3 дис­тиллированной водой, куда складывают покровные стекла после работы. Приготовление препарата для подсчета бледных трепонем необходимо проводить с максимальной точностью, так как при неточном разливе ингредиентов, при избытке или недостатке ис­следуемого материала в препарате можно получить недостоверные результаты. Учет результатов следует проводить в день постановки реакции, лучше всего тут же после центрифугирования, так как при длительном стоянии пробирок (15-24 ч) возможны ложноположительные результаты. Покровные стекла должны иметь размеры только 24х24 мм. Надосадочную жидкость берут микропипеткой объе­мом 0,1 мл.